一、本专利对应产品
本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种农杆菌介导的中间锦鸡儿瞬时表达体系的建立方法。
二、主要技术优势
本发明适用于叶片蜡质层较厚,叶片较小的植物,操作简单,表达水平高而且结果可靠,可为开展基因功能验证和筛选功能基因提供技术支持。
三、主要性能指标
(1)将含有GUS报告基因的表达载体电转化入农杆菌GV3101感受态细胞中;
(2)配置1/2MS液体培养基;
(3)将(1)中得到的农杆菌以及不含有任何外源载体的农杆菌GV3101在LB液体培养基
过夜培养至OD所需浓度,再用(2)中的培养基将菌体稀释到所需OD值,静置数小时;
(4)选取生长18~22d左右的中间锦鸡儿幼苗,剪去不适宜注射的叶片,将(3)制备所得
的农杆菌悬浮液缓慢的注射入叶片背面,使菌液充满叶片;
(5)瞬时转化后观察2-11天内中间锦鸡儿叶片GUS报告基因表达情况。
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