本发明提供一种小分子化合物介导的牛性控精子分选液及其应用,包括精子分选保护液和性控功能成分,所述精子分选保护液为:氯化钠、氯化钾、二水氯化钙、磷酸二氢钠、葡萄糖、丙酮酸钠、碳酸氢钠、青链霉素、酚红;所述性控功能成分为:肌酸、24e药物;所述肌酸的浓度为450 uM‑550 uM;所述24e药物的浓度为0.27 uM‑0.33 uM;所述24e药物为吡啶[3,2‑d]嘧啶类TLR7&8双激动剂;本发明能够满足生产中对性控精液的大量需求,而且分选过程是在精子所适宜条件下进行的且不需要对精子进行复杂的处理,分选花费时间少,对精子产生伤害小。
1. 一种小分子化合物介导的牛性控精子分选液,包括精子分选保护液和性控功能成分,其特征在于,所述精子分选保护液为:氯化钠、氯化钾、二水氯化钙、磷酸二氢钠、葡萄糖、丙酮酸钠、碳酸氢钠、青链霉素、酚红; 所述性控功能成分为:肌酸、24e药物; 所述肌酸的浓度为450 uM-550 uM; 所述24e药物的浓度为0.27 uM-0.33 uM; 所述24e药物为吡啶[3,2-d]嘧啶类TLR7&8双激动剂;所述24e药物的分子式为C21H28N6;分子结构式为 。
2. 如权利要求1所述的一种小分子化合物介导的牛性控精子分选液,其特征在于,每1000 ml所述精子分选保护液由氯化钠 6.902 g、氯化钾0.300 g、二水氯化钙0.330 g、磷酸二氢钠0.097 g、葡萄糖2.500 g、丙酮酸钠0.138 g、碳酸氢钠3.105 g、青链霉素2.5 mL、酚红400 uL和去离子水配制而成。
3. 如权利要求2所述的一种小分子化合物介导的牛性控精子分选液,其特征在于,每1000 ml所述精子分选保护液内加入24e药物98.41ug-120.28ug。
4. 如权利要求3所述的一种小分子化合物介导的牛性控精子分选液,其特征在于,每1000 ml所述精子分选保护液内加入肌酸59.01mg-72.12mg。
5. 如权利要求4所述的一种小分子化合物介导的牛性控精子分选液,其特征在于,使用方法如下: (1)、将采集的新鲜牛精液检测活力后使用精子分选保护液稀释后离心,去除上清液后使用牛性控精子分选液重悬精子; (2)、35℃-40℃条件下静置孵育60 min-90 min,得到孵育后的分层精液; (3)、将上述分层精液分离,得到上清液和沉淀,所述上清液为Y精液,所述沉淀为X精液; (4)、使用精子分选保护液将Y精液、X精液中的药物分别洗脱后,得到用于体外受精、人工授精、胞质内精子注射任一种用途的Y性控精液、X性控精液。
6. 如权利要求1-5任一项所述的小分子化合物介导的牛性控精子分选液的应用,其特征在于,用于鉴定公牛精子种类。
7. 如权利要求1-5任一项所述的小分子化合物介导的牛性控精子分选液的应用,其特征在于,用于制备鉴定公牛精子种类的试剂盒。
8. 如权利要求1-5任一项所述的小分子化合物介导的牛性控精子分选液的应用,其特征在于,用于分选或筛选公牛X、Y精子。
9. 如权利要求1-5任一项所述的小分子化合物介导的牛性控精子分选液的应用,其特征在于,用于制备分选或筛选公牛X、Y精子的试剂盒。
请联系平台
请联系平台